Benjamin Franklin Gates (Nicolas Cage) adalah seorang sejarawan, ahli kriptografi, dan pemburu harta karun yang berasal dari keluarga yang telah mencari harta karun legendaris yang ditinggalkan oleh para Bapak Pendiri Amerika Serikat selama beberapa generasi. Harta karun ini konon disembunyikan oleh Ksatria Templar dan Freemason, dan jejaknya tersebar di seluruh Amerika.
Penemuan awal
Ben, bersama rekannya yang seorang ahli komputer bernama Riley Poole (Justin Bartha), memulai ekspedisi yang didanai oleh seorang pemburu harta karun yang ambisius, Ian Howe (Sean Bean). Mereka menemukan petunjuk pertama pada sebuah kapal yang terkubur di dalam es di Kutub Utara, yang mengarah pada petunjuk selanjutnya yang tersembunyi di balik Deklarasi Kemerdekaan.
Pengkhianatan dan pencurian Deklarasi Kemerdekaan
Ketika Ian menyadari petunjuk itu mengarah ke Deklarasi Kemerdekaan, ia berencana untuk mencurinya demi keuntungan pribadi. Ben, yang menolak mencuri dokumen bersejarah tersebut, menentang rencana Ian, dan hal ini memicu permusuhan di antara mereka. Setelah nyaris dibunuh oleh Ian, Ben memutuskan untuk mencuri Deklarasi itu lebih dulu, bukan untuk memperkaya diri, melainkan untuk melindunginya dari tangan yang salah.
Pengejaran dan aliansi tak terduga
Ben dan Riley menjalankan aksi pencurian rumit di Arsip Nasional, dan di sana mereka bertemu dengan Abigail Chase (Diane Kruger), seorang kurator arsip yang tidak sengaja terlibat dalam kekacauan itu. Awalnya tidak percaya pada cerita Ben, Abigail perlahan mulai meyakini niat baik Ben dan bergabung dalam perburuan harta karun. Mereka kini berada dalam situasi pelik: dikejar oleh Ian yang jahat, dan juga oleh agen FBI yang mencurigai mereka.
Penguraian teka-teki
Dengan bantuan ayah Ben yang skeptis, Patrick Gates (Jon Voight), tim ini menggunakan kecerdasan dan pengetahuan sejarah mereka untuk memecahkan serangkaian teka-teki yang mengarah ke berbagai lokasi bersejarah di Amerika, seperti Independence Hall dan Trinity Church. Setiap petunjuk membawa mereka selangkah lebih dekat dengan harta karun, namun Ian selalu membayangi dan berusaha untuk mendahului mereka.
Puncak petualangan
Perburuan mencapai puncaknya di sebuah ruang bawah tanah kuno di New York, tempat Ian berhasil menyandera Patrick untuk memaksa Ben menunjukkan lokasi harta karun. Namun, Ben berhasil mengecoh Ian dengan petunjuk palsu yang mengarah ke Boston, sementara mereka melanjutkan perjalanan ke tempat penyimpanan harta karun yang sebenarnya.
Penemuan dan akhir cerita
Setelah Ian tertangkap oleh FBI berkat jebakan Ben, Ben dan timnya menemukan tumpukan harta karun yang luar biasa besarnya. Ben kemudian menyerahkan sebagian besar harta karun itu kepada pemerintah untuk disimpan di museum, sebagai imbalannya, nama keluarganya dipulihkan dan mereka diberi penghargaan. Film ini berakhir dengan Ben dan Abigail yang kini menjadi pasangan, serta Riley yang menjadi kaya berkat bagian kecil dari temuan tersebut.